PCR (Polymerase keðjuverkun) prófun er kjarnatækni í sameindagreiningum. Stöðlun umbúða- og prófunarferla þess hefur bein áhrif á nákvæmni og lífríki niðurstaðna. Þessi grein veitir faglegt sjónarhorn á helstu gæðaeftirlitspunkta í PCR prófunarferlinu.
Dæmi um kvittun og formeðferð eru fyrstu skrefin í ferlinu. Rannsóknarstofur verða að sannreyna stranglega auðkenningu sýnisins, flutningsskilyrði og geymslutíma til að tryggja heiðarleika sýnisins. Við móttöku verða sýni að vera númeruð og skráð í lífrænu skáp og gangast undir - vinnsluaðferðir eins og lýsingu og kjarnsýruútdrátt byggðar á prófunartegundinni. Tvö - sannprófunarkerfi er krafist á þessu stigi til að koma í veg fyrir kross - mengun.
Framkvæmd PCR viðbragðskerfis verður að framkvæma innan hreinn bekk. Rekstraraðilar verða að vera með stig 3 hlífðarbúnað og nota kjarna - ókeypis rekstrarvörur. Undirbúningur hvarfefnis fylgir meginreglunni „óeðlilegu verkflæði“ og færist frá hvarfefni undirbúningssvæðisins yfir í sýni vinnslusvæðið og síðan að magnunarsvæðinu. Neikvætt samanburðarhópur, jákvætt eftirlit og innra eftirlit verða að vera með í hverri viðbragðshóp til að fylgjast með gildi tilrauna.
Meðan á magnunar- og prófunarstiginu stendur verður PCR tækið að vera - kvarðaðar og hitastig hjólreiðar færibreytur staðfestar. Viðbragðsaðferðin felur venjulega í sér þrjú skref: denaturation (94 - 95 gráðu), annealing (50-65 gráðu) og framlenging (72 gráðu). Fjöldi lotna er aðlagaður út frá uppgötvunarmarkmiðinu. Rauntíma flúrljómun PCR þarf einnig að fylgjast með flúrljómunarmerkjaþröskuld sértækra rása.
Niðurstöður og skýrslur verða að fara fram af hæfum tæknimönnum. Að minnsta kosti tveir sérfræðingar verða að endurskoða hrá gögn til að staðfesta formgerð magnunarferilsins, trúverðugleika CT gildi og samræmi gæðaeftirlitsefna við staðla. Lokaskýrslan ætti að innihalda upplýsingar um prófunaraðferðina, grunninn fyrir túlkun niðurstaðna og yfirlýsingu um takmarkanir á prófunum.
Allt ferlið fylgir stranglega ISO 15189 og viðeigandi CDC forskriftum. Þrefalt ábyrgðarkerfi umhverfiseftirlits, viðhalds búnaðar og starfsmannaþjálfun er hrint í framkvæmd til að tryggja áreiðanleika og rekjanleika PCR prófana.